人血管内皮抑制素在毕赤酵母中的表达纯化及活性测定

血管内皮抑制素是胶原ⅹⅷc-末端的一个片段，是一个有效的血管生成抑制因子。本文克隆了人血管内皮抑制素的基因，并用毕赤酵母进行表达，表达量为50.5mg/l。发酵液上清经spsepharosefastflow凝胶一步层析，产物纯度达到98%以上，纯化收率达到95%以上。毕赤酵母分泌表达的人血管内皮抑制素具有免疫活性；能明显抑制鸡胚尿囊膜新生血管的生长；并且能特异性地抑制bfgf刺激的人微血管内皮细的迁移，达到抑制效果为50%时所需的蛋白浓度（ic50）为0.4μg/ml。本研究为应用人血管内皮抑制素治疗肿瘤奠定了初步实验基础。