根癌农杆菌介导的哈茨木霉菌遗传转化的研究

利用根癌农杆菌eha105进行了哈茨木霉th-33的转化，在优化的转化条件下，eha105对木霉菌的转化效率约45-100个转化子/106个孢子。本实验室利用该方法已建立了含4000多个转化子的木霉t-dna插入突变体库。随机挑选24个转化子进行遗传稳定性分析，结果显示转化子经过5代无选择压力连续转接后都能在选择平板上正常生长；潮霉素抗性基因的pcr扩增和southernblot杂交分析表明，木霉转化子含有该基因，southernblot杂交进一步表明转化子多为单拷贝随机插入。该转化体系的改进将有利于木霉菌生防功能基因的克隆和作用机制的研究。