柞蚕核型多角体病毒载体在培养细胞和休眠蛹中的基因表达效果

柞蚕核型多角体病毒（anpenpv）作为基因表达载体在柞蚕培养细胞（anpe细胞）和柞蚕蛹中已经成功地表达出了外来基因，并生产出了大量蛋白质。本文比较了anpenpv与苜蓿尺蠖核型多角体病毒(acmnpv)、家蚕核型多角体病毒(bmnpv)和美国白蛾核型多角体病毒(hycunpv)基因表达载体在培养细胞和昆虫活体组织内的β-半乳糖苷酶基因表达效果。结果显示，5×105个细胞中β-半乳糖苷酶的最高酶活性分别是anpenpv在anpe细胞为40.9units/ml（tc-100培养液，fbs10%）和59.9units/ml（sf-900ⅱ培养液），acmnpv在sf9细胞为72.4units/ml（tc-100，fbs10%）和66.4units/ml（sf-900ⅱ）、在high5细胞为326units/ml（ex-cell405培养液），bmnpv在bm4细胞为15.1units/ml（tc-100，fbs10%），hycunpv在spim细胞为68.6units/ml（sf-900ⅱ）。活体组织内β-半乳糖苷酶的最高酶活性分别是柞蚕雌蛹为14.3units/g、雄蛹为11.7units/g，家蚕幼虫是10.1units/g。实验证明anpenpv/anpe的外来基因表达水平与acmnpv/sf9和hycunpv/spim相似、比bmnpv/bm4高、不及acmnpv/high5；anpenpv/柞蚕蛹，其雌蛹比bmnpv/家蚕5龄幼虫的外来基因表达效果好、雄蛹与之无明显差异，说明anpenpv基因表达载体无论是在培养细胞还是昆虫活体组织中均可与其他npv基因表达载体相媲美。柞蚕蛹由于可以机械化、大规模地操作，显示对于大量生产蛋白质具有更好的应用前景。