一步法生产1,5-戊二胺谷氨酸棒杆菌基因工程菌的构建

1,5-戊二胺是一种重要的化工原料，发酵法生产1,5-戊二胺是一条新颖且具有潜在竞争力的生产途径。以蜂房哈夫尼菌(hafniaalvei)as1.1009基因组为模板，通过pcr扩增，得到大小约为2.2kb的赖氨酸脱羧酶基因ldc。以大肠杆菌(escherichiacoli)/谷氨酸棒杆菌(corynebacteriumglutamicum)穿梭质粒pxmjl9为载体，将扩增得到的目的基因片段克隆至谷氨酸棒杆菌c.glutamicumtk260512，获得重组菌株c.glutamicumtk260512/pxmjl9-ldc．在摇瓶发酵水平上，通过iptg诱导ldc基因的表达，并采用反相高效液相色谱方法测定了发酵液中1,5-戊二胺的含量，结果显示，经36h发酵，工程菌c.glutamicumtk260512/pxmj19-ldc的1,5-戊二胺产量为0.96g/l。