结核杆菌dnaa蛋白在耻垢分枝杆菌中的同源表达

目的：在耻垢分枝杆菌中表达重组结核杆菌dnaa蛋白并对表达产物进行鉴定。方法：用pcr的方法扩增结核杆菌dnaa基因并克隆至表达载体pmf406中，构建重组大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pmf-dnaa。经双酶切及测序鉴定后，用电转化的方法将重组质粒转至耻垢分枝杆菌mc2155中。用0.02%乙酰胺诱导重组耻垢分枝杆菌，对表达产物进行sds-page和westernblotting检测和鉴定。结果：重组耻垢分枝杆菌构建成功，sds-page及westernblotting结果显示该重组耻垢杆菌可以实现结核杆菌dnaa蛋白的同源高效表达。结论：结核杆菌dnaa蛋白的同源表达为结核杆菌dna复制机制的研究奠定了基础。