t66i突变提高hiv-1整合酶可溶性研究

在研究hiv-1整合酶（in）抗药性突变t66i时，发现这一突变同时可以提高整合酶的溶解性。原核表达了in1–288/t66i和野生型（wt），取菌体破碎后的上清，sds-page和his标签蛋白质染色进行分析，结果表明in1–288/t66i可溶性约是wt的2.4倍。600ml培养基中诱导表达in1–288/t66i/bl21，亲和层析纯化共收获蛋白质4.72mg。用改进的elisa方法测定in1–288/t66i和in1288/f185k/c280s链转移催化活性，结果显示两种蛋白质活性基本相当。提供了有别于f185k/c280s突变的另外一种整合酶可溶性表达的途径，in1–288/t66i重组蛋白还可以应用到整合酶抑制剂筛选中，以获取避开t66i抗药性突变的抑制剂。