植物乳杆菌zs2058的亚油酸异构酶基因在乳酸克鲁维酵母中的克隆表达

目的：将植物乳杆菌zs2058（lactobacillusplantarumzs2058）的亚油酸异构酶基因在乳酸克鲁维酵母（kluyveromyceslactis）中进行克隆表达。方法：根据ncbi中已报道亚油酸异构酶（linoleateisomerase，lai）基因的序列特征，设计引物对筛得的植物乳杆菌zs2058进行pcr扩增，得到亚油酸异构酶全基因序列，克隆至乳酸克鲁维酵母表达载体pklac1，电转化得重组菌pklac1-lai/kluyveromyceslactisgg799。结果：sds-page检测，重组菌进行分泌表达获得目的蛋白，大小约为67kda；气相色谱（gaschromatogram，gc）检测到共轭亚油酸（conjugatedlinoleicacids，cla）典型峰。结论：植物乳杆菌zs2058中的亚油酸异构酶基因在乳酸克鲁维酵母中得到分泌表达，重组酶转化效率约为26%。