集成干扰素突变体iifn72c的构建及其聚乙二醇定点修饰

目的：设计构建集成干扰素突变体iifn72c并进行聚乙二醇定点修饰，以获得高活性的长效干扰素分子。方法：利用蛋白质分子同源模建，选择在集成干扰素分子iifn的第72位引入半胱氨酸残基构成集成干扰素突变体iifn72c。诱导表达后经包涵体变复性和层析纯化，与单甲氧基聚乙二醇（mpegmal）定点偶联。修饰产物经纯化后，以sdspage考察其纯度，用wishvsv系统进行生物活性测定。结果：iifn72c以包涵体形式表达，表达量占菌体总蛋白的30%以上，比活性与突变前相当；修饰产物大多数为单修饰体，纯化后纯度大于98%，比活性保留约为修饰前的8%。结论：成功设计并表达iifn72c用于peg定点修饰，修饰产物活性保留得以提高。