一种基于pcr技术鉴定单拷贝转基因烟草的方法

为了鉴定携带单拷贝外源基因的转基因烟草植株，以烟草核基因组上已知的单拷贝内源基因（rnr2）为内参，转基因烟草植株基因组dna为模板，在同一pcr反应体系中扩增内源基因（rnr2）和外源目的基因（nptⅱ）。反应产物在琼脂糖凝胶上电泳，获得了预期大小的两条特异性扩增条带。经imagej软件捕捉分析两条目的条带的灰度比，当t1代转基因烟草植株中外源基因与内源基因的扩增条带灰度比为1时，所检测植株即为单拷贝外源基因的转基因烟草植株。孟德尔经典遗传学方法证实了上述检测结果高度可信。