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ISSN: 2333-9721
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毕赤酵母高密度发酵表达血管紧张素转化酶c-结构域

Keywords: 毕赤酵母,acec-结构域,蛋白降解,发酵

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Abstract:

血管紧张素转化酶(ace,ec3.4.15.1)在调节血压方面具有重要作用。研究证实,ace的c结构域(ace-c)是使血管紧张素i(angi)分解的主要活性位点。在5l发酵罐中,对重组毕赤酵母表达acec-结构域的发酵工艺进行优化,探讨温度、ph、甲醇浓度等主要因素对重组蛋白表达量和酶活力的影响。结果表明,当工业培养基添加2%蛋白胨为氮源时,acec-结构域的降解现象得到了有效控制;采用诱导温度为26℃,ph5.5,甲醇含量为1.5%的表达条件,acec-结构域表达量和酶活力分别达到446mg/l和38.2u/ml,比活力达到86u/mg,是sigma公司ace标准品比活力的2倍,为大规模制备acec-结构域蛋白,筛选专一性更强的acec-结构域抑制剂奠定了基础。

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