重组人asct2的c-末端胞外结构域的原核表达、纯化及鉴定

中性氨基酸转运蛋白（asct2）是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体，其最大的胞外结构域存在于c-末端的105个氨基酸（以下简称tail）。通过rt-pcr方法从人乳腺癌mcf-7细胞中克隆asct2基因编码区全长序列，再从中扩增asct2的tail序列，与pet-41b（克隆位点的n-和c-端分别有谷胱甘肽转移酶和his6标签序列）连接构建原核表达载体，重组质粒在大肠杆菌中获得表达，免疫印迹显示重组蛋白tail在细菌裂解液上清和沉淀（包涵体）中均有表达，可溶性部分经亲和层析纯化获得高纯度的tail蛋白，该蛋白可结合在表达合胞素的mcf-7细胞表面，提示其可能具有结合合胞素的活性。