促进cho细胞生长及其产物hngf表达的培养条件的初步研究

以稳定表达人神经生长因子（hngf）的重组工程cho细胞株为对象，采用无血清流加悬浮培养（fedbatchculture）方式，考察使用基础培养基(无特殊添加物)，分别添加丁酸钠、dmso、kh2po4的培养基及不同培养温度（32℃和37℃）对细胞生长和重组蛋白表达的影响。每日取样检测细胞密度、细胞活率、葡萄糖浓度、重组蛋白浓度。结果表明细胞培养温度由37℃下降至32℃，细胞生长周期明显延长，重组蛋白产量增加。5mmol/l丁酸钠和2%dmso的加入虽然提高了重组蛋白的表达量，但严重抑制细胞生长。最大的蛋白比生成速率（qngf）出现在37℃培养且添加2%dmso的培养条件下，而最高蛋白表达量则出现于32℃培养添加3.65mmol/lkh2po4的培养条件下。研究表明，将培养温度设为32℃，在基础培养基中添加3.65mmol/lkh2po4或1%dmso是提高hngf表达水平的有效方法。