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ISSN: 2333-9721
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人表皮生长因子融合蛋白的表达及纯化工艺的优化

Keywords: 人表皮生长因子,阿拉伯糖,小分子泛素样修饰蛋白,纯化

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Abstract:

探讨了在大肠杆菌中生产小分子泛素样修饰蛋白与人表皮生长因子(sumo-hegf)的最佳表达及纯化条件。将重组表达载体pet3c-sumo-hegf转化到大肠杆菌bl21(ai)中,以阿拉伯糖为诱导剂,对诱导表达参数进行优化,并进一步通过离子交换层析,ni-nta亲和层析及分子筛层析等进行纯化分析。结果表明:sumo-hegf在bl21(ai)中的最佳诱导表达温度为37℃,诱导剂阿拉伯糖的最佳浓度为5.0g/l,最佳诱导表达时间为4h,表达量约为20.2%,westernblot分析证实,纯化后的蛋白是hegf,为进一步开发hegf基因工程药物奠定了基础。

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