具超强富集u(ⅵ)能力工程菌e.coli的构建

以鼠伤寒沙门氏菌基因组dna为模板，pcr扩增得到非特异性酸性磷酸酶基因（phon），将其克隆到pmd18t-vector中。用spei、ndei限制性内切酶对重组转移载体t-vectorphon与穿梭载体pradz3分别进行双酶切，再将phon片段和穿梭载体pradz3中的大片段通过t4dna连接酶连接。经pcr与双酶切双重鉴定，证实重组穿梭载体pradz3phon构建成功。转化escherichiacolidh5α感受态细胞，使其在正常情况下表达phon蛋白，经westernblot证实phon基因在dh5α中成功表达。利用含pradz3phon的工程菌进行富集u(ⅵ)实验，结果表明该工程菌对u(ⅵ)的富集量较宿主菌提高约4倍，达46.16mg/g，去除率为92.32%。