alpha1抗胰蛋白酶核基质附着区增强rna聚合酶ⅱ依赖的转录

核基质附着区是一种真核生物的dna元件，能调控染色体结构和活性。为研究体内mar相关的染色质准入和转录调控，我们从人基因组中克隆了alpha1抗胰蛋白酶核基质附着区（α1-atmar）并将其连入pegfp-c1载体。分别以空载体和携带mar的载体通过脂质体法转染人胚肾293细胞系。经g418筛选20天的细胞池用作实验分析。半定量rt-pcr及荧光显微镜观察显示此mar能够增强临近基因的表达。进一步用染色质免疫共沉淀（chip）共定位cmv启动子和rna聚合酶ⅱ（rnapⅱ），pcr结果显示存在mar元件时，更多的rna聚合酶ⅱ被富集到启动子区。chip方法可用于证实mar介导的转录激活，在实时检测方面比rt-pcr提供了更多动力学信息。这项技术为我们进一步研究基因表达调控提供了技术平台。