纳米磁性壳聚糖微球固定化酵母醇脱氢酶的研究

建立了以纳米级磁性壳聚糖微球(magneticchitosanmicrospheres,m-cs)为载体固定化酵母醇脱氢酶(yeastalcoholdehydrogenase，yadh)的方法，优化了yadh的固定化条件，考察了固定化酶的性质。结果表明,m-cs呈规则的圆球形，粒径在30nm左右，具有较好的磁响应性。酵母醇脱氢酶固定化适宜条件为:50mg磁性壳聚糖微球，加入20ml0.25mg/ml酵母醇脱氢酶(蛋白质含量)磷酸盐缓冲液(0.05mol/l,ph7.0),在4℃固定2h。m-cs容易吸附酵母醇脱氢酶，但吸附的酶量受载体与酶的比例、溶液的离子浓度、溶液ph的影响明显，而温度对吸附的酶量的影响则相对较弱。相对于游离的酵母醇脱氢酶，固定化酶的最适温度略有升高，可明显改善其热稳定性、酸碱稳定性、操作稳定性和贮存稳定性。