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中国生物工程杂志 2008
重组野猪α-干扰素基因的高效表达和下游工艺的研发Abstract: 利用pcr方法,从东北野猪和长白猪的肌肉基因组dna中分别扩增出一条501bp的基因片断,与genbank上登载的猪α-干扰素基因序列相比,核苷酸同源性达到98.4%以上。以其中野猪α-干扰素基因片断为参考模板,经过密码子优化、5?和3?区域的mrna二级结构优化,全基因合成得到编码野猪α-干扰素基因成熟肽的基因。克隆该基因到原核表达载体pwl之中.随后转化至宿主菌dh-5α。经过sds-page电泳检测,发酵后的重组野猪ifn-α-干扰素基因的蛋白表达量大于25%。复性纯化后的重组蛋白,经过vsv-wish系统检测,其生物活性为4.45×106iu/mg。
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