重组野猪α-干扰素基因的高效表达和下游工艺的研发

利用pcr方法，从东北野猪和长白猪的肌肉基因组dna中分别扩增出一条501bp的基因片断，与genbank上登载的猪α-干扰素基因序列相比,核苷酸同源性达到98.4%以上。以其中野猪α-干扰素基因片断为参考模板，经过密码子优化、5?和3?区域的mrna二级结构优化，全基因合成得到编码野猪α-干扰素基因成熟肽的基因。克隆该基因到原核表达载体pwl之中.随后转化至宿主菌dh-5α。经过sds-page电泳检测，发酵后的重组野猪ifn-α-干扰素基因的蛋白表达量大于25%。复性纯化后的重组蛋白，经过vsv-wish系统检测，其生物活性为4.45×106iu/mg。