人canstatin基因转化新型生物反应器－杜氏盐藻(dunaliellasalina)的初步研究

本文采用rt-pcr技术从人的胎盘组织中克隆canstatin基因，定向连接到表达载体puω上，然后与筛选标记bar盒连接得到真核表达载体puω-can-bar。采用玻璃珠转化法将该表达载体转化杜氏盐藻（以下简称盐藻），通过草丁膦固体平板筛选得到转化株，进而对转化株进行阳性鉴定。pcr结果显示，在盐藻转化株中均能够扩增出约700bp特异的条带，而在阴性对照中没有扩增出该条带。southernblot结果进一步证明人canstatin基因已经整合到盐藻细胞的基因组中。此外，本文对盐藻转化株的遗传稳定行进行了分析，结果表明canstatin基因能够在转化藻株中稳定遗传。人canstatin转基因盐藻株的成功制备为利用盐藻反应器大规模生产人canstatin蛋白提供了实验依据，为及早实现canstatin蛋白在治疗肿瘤上的临床应用提供了前期工作基础。