人呼吸道合胞病毒m蛋白非复制型重组腺病毒的构建和鉴定

人呼吸道合胞病毒（humanrespiratorysyncytialvirus,rsv)基质蛋白（matrixprotein，m）在rsv形态发生上具有重要作用，因含有ctl抗原表位，在疫苗研究上具有一定意义。为此，应用rt-pcr方法从感染rsv的hep-2细胞中扩增获得m蛋白基因，构建了含m基因的非复制型重组腺病毒并进行表达和鉴定。基因序列分析显示rsvm基因仅有一处碱基发生错义突变。非复制型重组腺病毒dna分子fgad/rsvm转染293细胞，观察到细胞出现cpe，rt-pcr发现m基因有转录，westernblotting及间接免疫荧光分析检测到m蛋白。成功克隆a亚型rsvlong株m基因，并获得一株可表达a亚型rsvm蛋白的非复制型重组腺病毒fgad/rsvm，可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用。