人轮状病毒ztr-5株灭活疫苗的制备及小鼠血清免疫学评价

目的:研究人轮状病毒ztr-5株灭活疫苗的制备及在实验小鼠中的免疫原性评价。方法:轮状病毒ztr-5株在ma104细胞上经蚀斑筛选纯化后,获得单一克隆接种至vero细胞上适应性培养,免疫荧光定量检测病毒的感染性滴度,对收获的病毒液进行离心、超滤、分子筛纯化,甲醛灭活,抗原定量检测al(oh)3吸附制备的实验性疫苗。使用不同剂量(8eu、32eu、128eu、256eu)经肌内注射免疫小鼠,共免疫三次,免疫间隔2周。采用间接elisa法检测血清特异性抗体效价。结果:通过蚀斑纯化,筛选得到一株纯化的病毒株ztr-5纯-1,在vero细胞上适应性后感染性滴度达7.35logccid50/ml;大量培养收获的病毒原液滴度为7.57logccid50/ml,制备获得轮状病毒样品抗原含量为2560eu/ml;经肌内注射,初次免疫后,所有剂量组动物均获得抗体阳转,阳转率为100%;第一次加强免疫后,各组血清特异性抗体水平均明显增高,免疫剂量为128eu和256eu的两组小鼠血清抗体效价均达1∶10240;第二次加强免疫后,各剂量组(8eu、32eu、128eu、256eu)血清抗体效价依次达1∶5120,1∶7456,1∶14481.54,1∶14481.54。结论:人轮状病毒ztr-5株可在vero细胞上稳定增殖,所制备的疫苗具良好免疫原性,用128eu/2次免疫即可获得良好的免疫效果。