重组大肠杆菌产γ-环糊精葡萄糖基转移酶的摇瓶发酵优化

为了实现来源于碱性芽孢杆菌alkalophilicbacillusclarkii7364的γ-环糊精葡萄糖基转移酶的高效胞外表达,对ompa信号肽介导的e.colibl21(de3)/pet20b(+)-γcgt基因工程菌进行发酵培养基及发酵条件的优化,并进行正交试验,获得最优培养基:甘油5g/l、蛋白胨6g/l、酵母膏24g/l、钙离子6mmol/l、镁离子2mmol/l、甘氨酸0.75%、po43-0.1mol/l;在此基础上最适发酵条件:ph6.5、25℃培养、装液量30ml/250ml、转速220r/min、0.02%sds、在发酵10h时利用5g/l乳糖进行诱导,使得酶活从初始的5189.2u/ml提高到20268.8u/ml。研究结果得到高效表达的培养条件,为实现该酶的工业化应用打下了基础。