转铁蛋白受体单链抗体与bdnf融合蛋白的表达及活性鉴定

脑源性神经营养因子（bdnf）对中枢神经系统的多种神经元具有营养，修复和保护功能，但因无法通过血脑屏障限制了其应用。本文利用抗转铁蛋白受体（tfr）的单链抗体（ox26-scfv）作为脑转运载体，分别扩增单链抗体和bdnf基因，插入ptig-trx载体，构建融合基因表达载体ptig-trx/scfv-bdnf，在大肠杆菌bl21（de3）中实现了高效表达。经ni-nta金属鏊合层析柱纯化后，在41kd处可见目的纯化条带。大鼠gh3细胞免疫酶染色显示，scfv-bdnf融合蛋白能与转铁蛋白受体特异性结合。同时能够促进鸡胚背根节神经突起的生长，具备了bdnf的生物学活性。为使bdnf能够跨越血脑屏障成为中枢神经系统的治疗药物打下了实验基础。