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中国生物工程杂志 2006
hbcag和hbsag前s1表位肽融合蛋白的表达研究Keywords: 乙肝病毒核心抗原(hbcag),前s1表位,病毒样颗粒(vlp),纯化 Abstract: 构建、表达并纯化了hbcag与hbsag前s1表位肽融合蛋白btcs1,为开发新型hbv治疗和预防性疫苗提供实验依据。利用dna重组技术,构建了hbcag与hbsag前s1表位肽融合蛋白原核表达质粒pbtcs1,在大肠杆菌(hb101)中进行表达,用蔗糖密度梯度超速离心对表达产物btcs1进行纯化,用sds-page、sec、western-blot和电镜进行鉴定。结果表明成功构建了hbcag与hbsag前s1表位肽融合蛋白原核表达质粒pbtcs1,btcs1的表达量为20-25mg/l,dot-blot结果显示btcs1主要分布在30%-50%蔗糖介质中,sds-page和sec结果显示蛋白纯度>95%,western-blot结果显示btcs1可以与抗hbcag抗体和抗hbsag前s1抗体特异杂交,显色条带在约28kd处,电镜分析表明btcs1可以自主组装成病毒样颗粒(vlp),直径约为30-34nm。本研究为进一步探讨btcs1的功能及应用奠定了基础。
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