人肝再生增强因子cxxc活性结构域的研究

人肝再生增强因子(humanaugmenterofliverregeneration,halr)蛋白序列中有一段保守的cys-xaa-xaa-cys(cxxc)氨基酸序列，针对halrp的cxxc结构，对halr分别进行c65a和q88c突变，表达、纯化突变体蛋白。体外检测halrp和突变体的黄素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide,fad)辅助的巯基氧化酶活性，halr-fad和halrq88c-fad组与对照组比较有显著差异(p<0.05)，halr-fad和halrq88c-fad组之间无差异；halrc65a-fad组与对照组比较无差异。结果显示，通过c65a突变将cxxc结构破坏后，该突变体的巯基氧化酶活性完全丧失；通过q88c突变增加一个cxxc序列后，该突变体的巯基氧化酶活性较halr-fad未见明显增加；同时，fad不仅是halrp发挥巯基氧化酶活性必须的辅助因子，而且有助于halrp突变体蛋白的复性。