人白介素18(il-18)rgd模体抗黑色素瘤细胞b16活性研究

利用定点突变及dna重组技术，在人白细胞介素18(il-18)的cdna序列中插入了ggc序列，使il-18第39精氨酸残基和第40天冬氨酸残基之间插入一个甘氨酸残基，从而构建了rgd模体。此重组的cdna序列构建入表达质粒ppic9k，并转化pichiapastoris酵母gs115，利用表达系统进行了高效表达。用sephadexg-100凝胶过滤纯化表达产物，获得初步纯化的蛋白。研究表明，il-18在体外对黑色素瘤细胞株b16没有作用，而il-18-rgd抑制作用明显，ic50=8.10μmol/l；应用小鼠动物模型研究结果显示，il-18及il-18-rgd均对黑色素瘤细胞b16有抑制作用，且il-18-rgd比il-18的作用强；同时,对鸡胚绒毛尿囊膜(chickenchorioallantoicmembrane,cam)血管生成的抑制实验发现，il-18-rgd对cam血管生成的抑制作用也比il-18强。但il-18-rgd仍保存对pbmc诱导产生ifn-γ能力。结果提示，il-18-rgd在具有抗炎，抗感染作用的同时增添了抑制肿瘤血管新的功能。