人源性基因plc-γ1中sh2-sh2-sh3结构域的克隆、表达及纯化

利用rt-pcr技术将人源性plc-γ1中的sh2-sh2-sh3结构域基因扩增并克隆到载体pgex-2t中，经热激反应转化到大肠杆菌bl21菌株内，在低温（33℃）下、利用iptg诱导表达构建的重组基因的高效表达体系，利用谷胱甘肽琼脂糖（sepharose）4b纯化得到高表达的重组蛋白。sds-page和westernblot检测表明，plc-γ1的sh2-sh2-sh3结构域重组基因可在低温（33℃）条件下在e.colibl21细胞中稳定完整表达，但是在较高温度下（37℃）会产生sh2-sh2-sh3结构域不完全表达的现象。上述研究结果为人源性重组基因plc-γ1中sh2-sh2-sh3结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础。