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中国生物工程杂志 2011
人工microrna干扰dreb亚族a-5组转录抑制子基因增强了拟南芥对低温和高盐胁迫的耐受性Keywords: amirna,dreb亚族a-5组,转录抑制子,基因沉默,抗性 Abstract: 转录抑制子是一类与dna的特异位点结合并抑制其附近基因转录的蛋白质,主要通过与转录激活子或基本转录复合物发生作用以及引起染色质重排等3种方式来抑制目标基因的转录。dreb类转录因子的a-5组中共有6个转录抑制子,其功能和作用机制还有待进一步研究。通过设计人工microrna-a5(amirna-a5)使其较特异地作用这些抑制子的mrna,并将构建成功的pcambia-pre-amirna-a5表达载体转化到拟南芥中,最终得到了9株t2代转基因纯合子。real-timepcr检测表明,与野生型对照相比,转基因植株中靶基因的表达量有明显降低。抗性分析的结果显示与野生型植株相比转基因植株在低温和高盐胁迫条件下其相对离子渗漏率(rel)和丙二醛(mda)含量增加都比较少,表明转基因植株对低温和高盐胁迫的耐受性增强,这为进一步研究dreb亚族a-5组转录抑制子在胁迫条件下的功能和作用的分子机制奠定了基础。
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