刺糖多孢菌电转化条件研究

以经理化诱变选育的多杀菌素高产菌株刺糖多孢菌(saccharopolysporaspinosa)cb11为受体菌,将具有安普霉素(apramycin)抗性标记的整合型载体pset152作为质粒供体,研究了制备刺糖多孢菌感受态细胞时菌体的生长阶段、质粒dna浓度、电场强度等因素对电转化效率的影响,结果表明,在菌体培养48h至对数中期制备感受态,电场强度为12kv/cm,最小dna浓度为0.1μg时可获得最高的转化效率,转化子的安普霉素抗性基因的pcr扩增及抗性稳定性实验从分子水平及细胞水平验证了pset152质粒能整合在刺糖多孢菌的基因组中并能稳定遗传,所有结果表明所建立的刺糖多孢菌电转化体系是行之有效的。