p38蛋白激酶参与bmp9诱导的c3h10t1/2细胞成骨分化

目的:初步分析丝裂原活化蛋白激酶p38在bmp9诱导间充质干细胞c3h10t1/2成骨分化过程中的作用。方法:利用bmp9重组腺病毒感染c3h10t1/2细胞,westernblot检测p38激酶总蛋白表达水平和磷酸化水平。p38的特异性抑制剂sb203580抑制p38活性或rna干扰抑制p38表达后,分析alp活性变化,利用茜素红s染色检测钙盐沉积,realtimepcr检测smad6和smad7的mrna表达水平,动物实验确认在rna干扰p38蛋白激酶后,对于bmp9诱导的c3h10t1/2细胞异位成骨的影响。结果:bmp9不影响p38激酶的蛋白表达水平,但却可以促进p38激酶的磷酸化;p38抑制剂sb203580可剂量依赖性地抑制由bmp9诱导的c3h10t1/2细胞的碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,alp)活性,rna干扰导致p38基因沉默同样也可抑制bmp9诱导的alp活性,但抑制效应不及sb203580;sb203580还能够抑制bmp9诱导的c3h10t1/2细胞的钙盐沉积;bmp9的靶基因smad6和smad7的mrna表达也能被sb203580所抑制;干扰p38蛋白激酶可抑制bmp9诱导的c3h10t1/2细胞在裸鼠皮下异位成骨。结论:p38蛋白激酶参与了bmp9诱导的c3h10t1/2成骨分化。