抗p185工程抗体表达与纯化的研究

人类的原癌基因her-2编码一个185kda的跨膜受体酪氨酸激酶，也称为p185，是肿瘤相关蛋白，在多种癌细胞，特别乳腺癌中有高表达。本实验室构建了抗p185/her-2的二价的嵌合抗体（scfv-fc），并证明其保留了亲本抗体的特异结合活性，进而建立了高表达的细胞株。本研究对该嵌合抗体进行滚瓶大规模培养，并对培养产物的纯化条件进行了摸索，建立了亲和层析和阳离子交换层析两步法。最终产物的纯度达到95％以上，回收率为63％。我们还摸索了嵌合抗体的冻干保存条件，抗体可以保持其稳定性和结合活性达一年以上。嵌合抗体纯化工艺和保存条件的确定，为进一步的临床研究奠定了基础。