ndvf48e9株与lasota株f蛋白b细胞表位差异分析区段的鉴定和免疫原性比较

本文对预测的ndvf48e9强毒株和lasota疫苗株f蛋白优势表位进行比较分析。根据预测结果设计克隆了两个毒株f蛋白各4段表位区，分别将每个毒株的4段表位区连接到原核表达载体上进行了体外表达，鉴定得到4段多肽的大小分别是p1：8.0kd、p2:10.8kd、p5:13.5kd、p6:10.5kd。应用f48e9和lasota特异性抗血清对表达各肽段进行了抗原性鉴定，p1、p2、p5、p6段均呈阳性反应，表明其中含有线性b细胞表位。其中f48e9p5(fp5)和lasotap5(lp5)与血清反应时有明显差异。fp5和lp5与鸡il-18成熟肽（mchil-18）蛋白以不同组合免疫spf鸡，elisa检测各组的免疫活性，结果发现fp5与mchil-18蛋白联合免疫组的抗体水平高于lp5与mchil-18蛋白联合免疫组、fp5、lp5单独免疫组；用ndvf48e9株攻毒结果显示fp5具有20%的保护率，说明p5段与f蛋白免疫原性相关，而lasotap5不能抵抗强毒的攻击，证明该表位区域在两个毒株之间存在着免疫原性差异。