水牛sry基因的克隆及序列分析

根据荷斯坦牛sry基因设计一对引物，采用聚合酶链式反应（pcr）技术，以中国沼泽型水牛（swampbuffalo）基因组dna为模板，扩增得到sry（sexdeterimationregionofychromosome）全序列约2005bp，其中1-504bp为5’启动子区，1196-2005bp为3’侧翼序列，在505-1195bp为sry的外显子，编码229个氨基酸。在sryhmgbox区域设计探针，用地高辛标记后分别与雄性、雌性水牛基因组dna进行southern杂交，结果显示该段序列只在雄性dna样本中有杂交信号，证明sry基因为雄性特异。blast比对结果显示与牛属动物sry基因的同源性为96％，其中sry基因hmgbox区域同源性高达99%，说明sry基因具有高度的进化保守性