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中国生物工程杂志 2006
柔红霉素产生菌sipi-1482中dnmv基因功能的阻断及恢复Keywords: dnmv,柔红霉素,同源重组,基因阻断,功能补偿 Abstract: dnmv基因产物为柔红霉素生物合成途径中tdp-6-脱氧己糖c4酮基还原酶,破坏该基因能阻断柔红糖胺的合成,进而阻断柔红霉素的产生。从天蓝淡红链霉菌(s.coeruleorubidus)sipi-1482基因组dna中经pcr扩增出dnmv及其上游dnmu基因片段,并由此构建了用于阻断dnmv基因的同源重组质粒pyg817,转化sipi-1482菌株后成功地破坏了dnmv基因,发酵结果显示阻断突变株不再代谢产生柔红霉素,为引入新的基因来改变代谢产物的糖基结构打下了基础。通过导入dnmv基因表达质粒可重建该突变株的生物合成途径,恢复产生柔红霉素,但产量比出发菌株要低。
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