甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

采用pcr的方法，以枯草芽孢杆菌bacillussubtilis基因组dna为模板，克隆出甘露聚糖酶man的成熟肽编码序列，将其插入巴斯德毕赤酵母pichiapastoris表达载体ppic9k中，并位于α-因子信号肽序列的下游，获得重组质粒ppic9k-man。重组质粒线性化后用聚乙二醇法导入毕赤酵母pichiapastoris菌株gs115中，经大量筛选，获得高效分泌表达甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株man22。将此菌株在5l发酵罐中进行高密度发酵，测定酶活最高达1102iu/ml，同时对重组甘露聚糖酶的性质进行了初步研究。