以重组p-gp为抗原建立检测mdr1抗体间接elisa方法的研究

目的:构建mdr1基因原核表达质粒，表达p-gp重组蛋白，建立检测mdr1抗体的间接elisa方法。方法:利用重组pcr技术扩增mdr1基因的1kb片段，克隆至pet-28b（＋）中，构建原核表达质粒petp-gp，转染感受态菌bl21（de3）和bl21（de3）plyss；以e.coli高效表达的p-gp基因主要抗原编码区重组蛋白为抗原，以hrp标记的兔抗人igg为二抗，建立间接elisa检测方法。结果:正确构建了petp-gp原核表达质粒，并可在e.coli中高效表达，表达蛋白可用作检测mdr1抗体elisa抗原。结论:成功表达出重组蛋白p-gp，建立了检测mdr1抗体的间接elisa方法。