猪抵抗素(resistin)的原核表达及表达产物的纯化鉴定

用pcr方法扩增到抵抗素基因(resistin,rstn)并将其亚克隆至pet-32a(+)表达载体，获得重组质粒pet-rstn。将重组质粒转化大肠杆菌bl-21（de3）感受态细胞，用iptg诱导表达。sds-page检测结果表明，重组resistin蛋白分子量大小约30kda。对表达条件如温度、iptg浓度及诱导时间进行优化并用sds-page检测。结果表明，30℃、4h、iptg浓度为1mmol/l时，可溶性重组resistin的含量最高。表达产物经westernblot检测证实是resistin蛋白，并用镍离子亲和层析的方法获得纯化的resistin蛋白。