thermobifidafusca海藻糖合成酶基因的克隆表达及发酵优化

将来源于嗜热单孢菌(thermobifidafusca)的海藻糖合成酶基因进行克隆表达,构建重组菌e.colibl21(de3){pet-24a(+)/tres}。并对基因工程菌的发酵产酶条件进行优化,得到最优培养基成分为:甘油12g/l,酵母粉24g/l,蛋白胨12g/l,磷酸盐浓度60mmol/l,zn2+2mmol/l。最佳培养条件为:装液量20ml(250ml摇瓶),发酵2h后25℃诱导并添加终浓度为0.4mmol/l的iptg。优化后的最终发酵酶活达到28.6u/ml,为未优化前的3.4倍,是目前国内报道大肠杆菌摇瓶发酵产海藻糖合成酶的最高表达水平,为该酶的工业化生产奠定了基础。