比较牛催乳素与生长激素对外源基因表达的影响

目的:用牛生长激素(bgh)和牛催乳素(bprl)乳腺特异载体dna分别转染携带人转铁蛋白(htf)的转基因小鼠乳腺上皮细胞,比较这二种载体对外源基因(人转铁蛋白)的表达影响,为研制特异、高效表达外源蛋白转基因动物过程中载体的合理构建,提供有价值的理论和技术基础。方法:将构建β-酪蛋白启动子(p1a3)调控的bgh和bprl乳腺特异表达载体分别转染体外培养的转基因小鼠乳腺上皮细胞;并将转染pcdna3.1质粒和未转染细胞作为对照,收集不同代数的细胞及上清液,用rt-pcr及elisa法分析mrna及蛋白,分析比较二者对htf表达水平的影响。结果:rt-pcr显示人转铁蛋白转录电泳条带明显;elisa表明二者均能提高htf蛋白水平的表达。结论:首次应用牛生长激素和催乳素对外源基因表达影响作用进行比较研究;β-酪蛋白启动子(p1a3)调控的bgh和bprl均能促进在乳腺上皮细胞水平上外源蛋白表达。因此,在研制转基因动物——乳腺生物反应器中,采用bgh和bprl促进乳汁中外源蛋白特异、高效表达的载体都将是可选择的新技术途径。