n端焦谷氨酸环化封闭类单克隆抗体药物的n端测序方法

目的:对于直接用n端测序仪无法进行测序的n端焦谷氨酸环化封闭的抗体类药物,去除焦谷氨酸后实现对其n端序列的从头测序。方法:对抗体的重轻链分别进行n端测序无果,再通过lc-msms对其重轻链n端的焦谷氨酸进行确认,证明其为焦谷氨酸封闭。对抗体蛋白进行焦谷氨酸氨肽酶酶解后,再通过n端测序仪进行edman降解法n端测序,获得抗体药物重轻链的n端氨基酸序列。结论:抗体药物的重轻链n端经过n端测序仪测序和lc-msms分析,确定均为焦谷氨酸封闭。再经过焦谷氨酸氨肽酶处理后进行n端测序仪从头测序证实抗体药物的n端序列与理论序列一致。