echs1经线粒体途径调控hepg2细胞凋亡

目的:观察烯脂酰辅酶a水合酶短链1(enoyl-coahydrataseshortchain1,echs1)对hepg2细胞凋亡的影响。方法:构建echs1基因的干扰质粒,转染hepg2细胞后通过嘌呤霉素筛选稳定干扰echs1的细胞株(hepg2-siechs1),利用westernblot验证其干扰效率;利用流式细胞仪及tunel方法检测echs1干扰后hepg2细胞凋亡情况,再采用westernblot检测凋亡相关蛋白表达水平。结果:成功构建了echs1的干扰质粒;westernblot验证了echs1干扰后hepg2细胞株中echs1表达低于空白对照组(未转染hepg2细胞)及阴性对照组(空载体pu6转染hepg2细胞)(p<0.05);流式细胞仪术显示hepg2-siechs1组细胞株凋亡率(14.98±1.07)%,阴性对照组(10.55±0.19)%,两者差异有统计学意义(p<0.05);tunel实验显示hepg2-siechs1组细胞株凋亡率(6.13±0.12)%,阴性对照组(2.89±0.21)%,两者差异有统计学意义(p<0.05);与阴性对照组比较,echs1干扰后p53、促凋亡蛋白bax及bid均表达增加。结论:echs1通过线粒体途径拮抗hepg2细胞凋亡。