magainin和ceca-mil抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中的高效表达

选用毕赤酵母偏爱密码子,设计合成了新型抗菌肽基因。所合成的magainin基因和cecamil杂合肽基因全长分别为101bp和60bp,并在其n端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然n端。其中,cecamil杂合肽基因根据cecropinan端第1～7个氨基酸残基、melittinn端第5～12个氨基酸残基所设计合成。基因分别克隆入ppiczαa质粒,构建分泌型重组酵母表达载体ppiczαamag和ppiczαacm。在aox1(醇氧化酶)启动子调控下,类似天然抗菌肽大小的magainin及cecamil蛋白获得分泌表达,其表达量分别为105mgl和118mgl。初步抑菌活性测定,显示两者对金黄色葡萄球菌及e.colidh5α有较好的抑杀活性。