本氏烟ⅰ型启动子的克隆及其转录起始位点分析

启动子是转录水平上一个重要的调控元件，其决定着基因的表达模式和表达强度。ⅰ型启动子具有高转录活性和种属间特异性等特点。如将其应用于植物rna病毒载体表达系统，有利于提高表达系统的表达效率和生物安全性。本氏烟（nicotianabenthaminana）是一种被广泛地应用于植物生物反应器和植物病理学的模式生物，但是现有核酸数据库中尚没有其ⅰ型启动子的相关信息。因此，克隆本氏烟ⅰ型启动子并分析其转录起始位点就具有重要的应用价值。通过半巢式pcr获得了514bp的本氏烟ⅰ型启动子序列（kc352713）；生物信息学分析初步预测其转录起始位点位于其核心序列tata（g）ta（n）ggggg中的第3位a处；通过植物rna病毒表达载体和5’race技术在体内验证本氏烟ⅰ型启动子转录起始位点与生物信息学预测结果一致。研究结果为深入研究ⅰ型启动子和构建ⅰ型启动子介导转录的植物rna病毒载体表达系统奠定了基础。