人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆及在毕赤酵母中的表达

采用加长引物5＇端的方法克隆了hgm-csf的编码基因，克隆过程中对该基因的局部做了密码子优化。然后克隆进毕赤酵母分泌型表达载体ppic9k，电击转化毕赤酵母。pcr、sds-page与westernblotting证实hgm-csf已整合进酵母基因组，摇瓶水平粗蛋白表达量达389mg/l，动物实验证实蛋白产物活性正常，sds-page与n-糖苷酶f去糖基化分析发现hgm-csf被糖基化。