草鱼穿孔素c端溶细胞活性分析

穿孔素的溶细胞作用是机体杀伤病毒和其他微生物感染细胞以及肿瘤细胞的一种效应机制。穿孔素在鱼类非特异性免疫中起重要作用。为了解鱼类穿孔素的功能，根据穿孔素基因序列特征，在已构建的草鱼肝肾cdna文库中克隆了草鱼穿孔素基因c端包含1个完整蛋白激酶c保守结构域(c2)的cdna。将该cdna与表达载体pet32a连接并转化表达菌de3，诱导表达。his-bind亲和柱纯化获得了草鱼穿孔素c端表达多肽(pfp-c)。将pfp-c与兔红细胞共育，结果表明：pfp-c具有溶血功能，且在ph7.5时活性最大，其溶血活性对ca2+有明显的依赖性。