腺病毒介导的人巨细胞病毒ul49基因小鼠模型的建立

建立表达hcmvul49基因的转基因小鼠，为抗病毒药物研究提供有效的实验动物模型。本实验将ul49-gfp基因插入腺病毒穿梭质粒pdc316中,构建重组质粒pdc316-ul49-gfp，与腺病毒骨架质粒pbhgloxδe1,3cre通过脂质体介导共转染293细胞，重组产生腺病毒ad-ul49-gfp,经pcr和westernblot鉴定正确后，大量扩增、纯化，制备高滴度重组腺病毒。纯化腺病毒经尾静脉注射感染小鼠，通过荧光定量pcr和westernblot方法，检测ul49基因在小鼠体内组织分布和表达时相。结果显示ul49基因在小鼠的心、肝、脾、肺、肾组织均有表达，并且表达量由高到低顺序依次是：肝、脾、肾、心、肺，在腺病毒感染第3天在各靶器官表达水平较高，此后逐渐下降，第14天时仅存在肝和脾中。表明表达ul49基因的小鼠模型构建成功。小鼠模型的成功建立为下一步筛选以ul49基因为靶的抗病毒药物奠定了基础。