人semaphorin4d慢病毒载体的构建及鉴定

目的:构建并制备能够有效表达semaphorin4d的重组慢病毒。方法:从人急性t细胞白血病jurkat细胞dna扩增人semaphorin4d基因,克隆至pwpigw慢病毒载体上,与pvsvg及pspax质粒共转染人胚肾293t细胞,包装出重组慢病毒,将纯化后的重组病毒直接感染293t和huvec细胞,通过免疫印迹、免疫荧光染色和血管内皮细胞迁移分析等方法检测semaphorin4d的表达和诱导血管内皮细胞迁移的作用。结果:重组慢病毒介导semaphorin4d在293t和huvec内获得表达,能介导血管内皮细胞迁移。结论:成功构建了表达semaphorin4d的重组慢病毒载体。