邻苯二甲醛(opa)法检测铝吸附疫苗中抗原含量

目的:建立快速测定铝胶吸附的疫苗中抗原含量的opa荧光检测法。方法:利用邻苯二甲醛(opa)在2-巯基乙醇存在下与氨基酸的n端或l-谷氨酸侧链反应,在460nm处生成荧光衍生物的原理,建立了无需进行抗原蛋白提取的检测方法,并对该方法的特异性、线性、精密度、回收率、重复性进行考察。同时,配合钠十二烷基的硫酸盐-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sds-page),研究在配制过程中抗原蛋白与佐剂是否分离。结果:opa荧光法,在抗原蛋白含量为0.02~0.16mg/ml时,线性良好,准确度达90%~115%,批内和批间相对标准偏差≤15%。电泳结果显示,cpg的加入可能会导致少量抗原蛋白从铝胶中解离。结论:该方法快速、准确、灵敏度较高,重复性好,可以应用于含铝胶疫苗制剂的实验室甚至生产质控过程。