禾谷镰刀菌中fgpde1基因的敲除及其功能的研究

目的:旨在敲除禾谷镰刀菌fusariumgraminearumfgpde1基因,确定其缺失突变体表型,从而分析该基因的生物学功能。方法:应用split-marker技术构建含有潮霉素基因敲除盒,通过peg介导原生质体转化,pcr筛查抗潮霉素转化子以获得缺失突变体δfgpde1,根据突变体表型变化及致病性的检测对fgpde1基因的功能进行分析。结果:采用split-marker技术,成功构建了fgpde1基因敲除盒;peg介导转化禾谷镰刀菌原生质体后成功获得转化子。经pcr筛查,得到3个pcr确认的敲除突变体;表型观察发现,δfgpde1菌落的外型及菌落生长速度与野生型没有明显差异。孢子侵染西红柿果实实验证明:以西红柿为侵染宿主,相对于野生型,突变体致病性没有明显减弱;但突变体分生孢子产量显著下降。结论:fgpde1基因可能与禾谷镰刀菌分生孢子的形成有关。