14-3-3γ蛋白协同mtor信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞生理功能

14-3-3γ作为蛋白质与蛋白质之间的"桥梁蛋白",广泛参与细胞凋亡、细胞分裂、信号转导和蛋白质合成等生物体所有的重要生命活动的调节。以体外培养的荷斯坦奶牛(vaccas)乳腺上皮细胞(dairycowmammaryglandepithelialcells,dcmecs)为模型,研究14-3-3γ对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂合成的影响。瞬时和稳定转染pgcmv/ires/egfp/14-3-3γ即14-3-3γ过表达的奶牛乳腺上皮细胞,应用casy细胞活力分析仪分析细胞活力的变化,测定细胞中甘油三脂(triglyceride,tg)和β-酪蛋白(β-casein,csn2)的合成,并且通过westernblot检测dcmecs中mtor(mammaliantargetofrapamycin,mtor)和p-mtor的表达量,探究14-3-3γ影响奶牛乳腺上皮细胞生理功能的机制。结果显示,瞬时和稳定转染pgcmv/ires/egfp/14-3-3γ的奶牛乳腺上皮细胞相对正常培养的奶牛乳腺上皮细胞,细胞活力极显著增强(p<0.01),csn2和tg表达量极显著增加(p<0.01),同时mtor和p-mtor的表达量也显著增加(p<0.01)。研究结果表明14-3-3γ参与泌乳关键信号通路即mtor信号通路,能够增强乳腺上皮细胞活力,促进奶牛乳腺上皮细胞csn2和tg的合成,丰富了奶牛泌乳信号通路,为乳品质研究提供了新的理论依据。