肺炎链球菌sp0306蛋白的表达纯化及结晶研究

sp0306蛋白是肺炎链球菌tigr4菌株中的一种假想的转录因子,但其蛋白三维结构及生物学功能尚未明了,生物信息学分析提示其可能调控碳水化合物代谢相关基因的表达。成功构建了sp0306蛋白的全长表达载体pet28a-sp0306,利用大肠杆菌bl21(de3)菌株进行原核表达,获得了以可溶形式表达的目的蛋白。经ni-nta柱亲和层析及deae阴性离子交换层析纯化后,获得了高纯度的目的蛋白。采用悬滴气相扩散法获得了质量较好的sp0306蛋白晶体,并初步进行了晶体x射线衍射,为其最终的三维结构解析及生物学功能研究奠定了基础。